随着护肤场景及需求的日益增长，消费者对护肤品的关注点已从基础护理逐步转向功效实现，产品实际有效性也更受大众关注。重组胶原蛋白是采用合成物学方法制造的一类生物活性成分，近些年来在敷料和护肤品等领域应用越来越广泛。近期，围绕重组胶原蛋白成分检测的方法与结果可信度引发了广泛讨论，众多专业人士自发选品检测，检测方法各有论点。那么，究竟如何科学检测，其结果才具有足够的科学说服力和行业公信力？
多方权威深入探讨
揭示重组胶原蛋白成分检测核心难题
5月30日，中国生物工程学会科创中国工作委员会联合昌平合成生物制造转化加速中心举办了“复杂基质中重组胶原蛋白检测方法”研讨会。会中，生物医药、分析检测、材料科学等多领域专家聚焦复杂基质中重组胶原蛋白的分离与纯化技术挑战、高灵敏度及高特异性检测方法的开发与验证、标准化检测体系的建立与行业监管需求等主题，解析技术难点，分享实践经验，并为检测技术的优化与相关标准的制定提供建议。
图： “复杂基质中重组胶原蛋白检测方法”研讨会
国家蛋白质科学中心研究员贾辰熙表示，化妆品中的重组胶原蛋白检测相较于敷料类医疗器械和生物样本更为复杂。化妆品中添加了植物提取物、蛋白质、多糖、脂类、表面活性剂及色素等多种成分，会严重干扰胶原蛋白信号，导致检测时其信号较弱。同时，化妆品中胶原蛋白添加量通常较低，对低浓度物质进行定量检测难度大。
成分检测没有“万能钥匙”
方法学验证是关键
目前，针对复杂基质中重组胶原蛋白的检测方法尚未出台国家统一的标准。中国科学院过程工程研究所研究员张贵锋介绍，蛋白检测方法主要有凯氏定氮法、双缩脲法、考马斯亮蓝法、福林酚法、BCA法及特征多肽法等。
图：张贵锋教授做《复杂基质样品中重组胶原蛋白的检测方法》主题报告
对于不同的检测方法，与会嘉宾纷纷表示，不同的检测方法各有特点，均有其适配的应用场景，无关新旧，关键是要根据不同基质，建立样品前处理方法，有效排除基质的干扰，选择和建立针对复杂基质的检测方法，并通过方法学验证其检出限、定量限、线性、精密度、准确性及检测回收率。
清华大学化学系教授、中国科学院院士李景虹解释说，复杂基质中重组胶原蛋白的分子检测存在降解过程复杂等难点，不能选用单一的检测方法，需根据不同蛋白的差异性选择相应的检测方法，并对不同类型重组胶原蛋白的不同氨基酸序列、结构包括动态变化和相互作用进行研究和验证。
中国食品药品检定研究院研究员徐丽明介绍，重组胶原蛋白产品中的复杂基质是影响成分检测的重要因素。现行的标准化检测方法主要针对纯蛋白质样品，测定方法在复杂基质中进行套用时，需考虑基质影响，做好样品前处理方法研究和验证。“当复杂基质导致重组胶原蛋白成分提取困难时，需要研究基质存在情况下的前处理方法，并确保定量用标品和供试品是相同的检测条件（基质环境），如基质加标的方式，且需通过多种方法进行相互验证。”
北京师范大学化学学院教授闫东鹏指出，为了排除干扰，提高检测的准确性，需要提供重组胶原蛋白产品前处理的方法，根据不同应用场景、不同研究体系，采用不同方法进行优势互补。
针对复杂基质中重组胶原蛋白的检测方法，徐丽明建议，可以采用多种方法进行考察，比如双缩脲法和氨基酸法等，但是也需进行充分验证。“双缩脲法是在行业标准里列出的一个方法，但是在复杂基质里使用要进行充分的方法学验证。氨基酸法是把重组胶原蛋白水解成氨基酸，存在氨基酸水解效率的问题，还有检测器灵敏度的问题，同样需要进行方法学验证，另外还要考虑如何去除复杂基质的干扰问题。”
她强调，只有建立了方法学验证后的技术标准才能确保检测结果的可信性。
成分检测亟需标准
共促行业有序发展
值得关注的是，对重组胶原蛋白进行准确检测是一个高度复杂的过程，特别是在护肤品成分这类“复杂基质”中，未经完整链路的检测验证，其数据往往缺乏参考价值。 正因如此，行业亟需凝聚多方力量，共同推动科学、统一的国家标准的建立与出台，有效规避因检测标准缺失而导致的功效成分含量不明确等问题，保障消费者权益，并最终助力重组胶原蛋白产业健康、可持续发展。
*数据引自新华网报道研讨会专家共识
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